Implementação da análise de RNA na identificação de fluidos corporais como ferramenta de apoio à perícia em genética forense

Abstract

Introdução

A identificação da natureza biológica de fluidos corporais em vestígios forenses é essencial para a reconstrução de eventos no âmbito de investigações criminais. Tradicionalmente, recorrem-se a métodos imunológicos e químicos para este fim; contudo, estes apresentam limitações em termos de sensibilidade, especificidade e capacidade de análise de misturas (Sijen & Harbison, 2021). A biologia molecular, nomeadamente através da análise de marcadores de RNA, tem-se afirmado como uma abordagem promissora na identificação de fluidos corporais, beneficiando das diferenças de expressão génica associadas à especificidade tecidular de determinados genes (Lindenbergh et al., 2013; Sirker et al., 2017).

Objetivos

O presente trabalho visa a implementação e validação de um painel multiplex de marcadores de RNA mensageiro (mRNA) para a identificação de sete fluidos corporais, com o objetivo de apoiar a atividade pericial em genética forense em Portugal. Foram selecionados 19 marcadores de mRNA específicos para sangue periférico e menstrual, secreção vaginal, saliva, sémen e mucosas nasal e retal.

Material e Métodos

Amostras de referência provenientes de diferentes tecidos estão a ser utilizadas para o desenvolvimento e otimização de um sistema multiplex, com amplificação simultânea dos marcadores de mRNA numa única reação de PCR. A síntese de cDNA e a deteção dos produtos amplificados por eletroforese capilar permitirão avaliar a especificidade, sensibilidade e reprodutibilidade do painel.

Atualmente, o trabalho encontra-se em fase de otimização das condições experimentais e avaliação preliminar da expressão dos marcadores.

Resultados e Discussão

Os resultados preliminares demonstram padrões de expressão consistentes e específicos para cada fluido corporal avaliado suportando a especificidade tecidual de cada marcador de mRNA. A integração da análise de RNA com a extração simultânea de DNA reforça o valor probatório dos vestígios biológicos, ao permitir a interpretação combinada da origem biológica e da identidade genética do dador. Espera-se que a validação do sistema confirme a sua aplicabilidade na identificação de fluidos corporais em contexto forense, contribuindo para o reforço da capacidade pericial e para a modernização das práticas de genética forense em Portugal.

Conclusão

O painel desenvolvido constitui um contributo relevante para o reforço da capacidade pericial e para a reformulação da prática da genética forense em Portugal.